Johan Dahlin
81790199af
All checks were successful
Deploy Quartz site to GitHub Pages / build (push) Successful in 2m4s
24 lines
1.1 KiB
Markdown
24 lines
1.1 KiB
Markdown
---
|
|
date: 2022-12-19
|
|
tags:
|
|
- biokemi
|
|
- provfråga
|
|
- utforska-proteiner
|
|
---
|
|
Du jobbar på labb över sommaren och har fått i uppgift att köra affinitetskromatografi med en 6xHis-tag.
|
|
|
|
A) Beskriv kortfattat principen för affinitetskromatografi.
|
|
B) Hur kan man eluera proteinet?
|
|
C) Ange en metod som kan användas för analys av det eluerade proteinet.
|
|
*Max 200 ord.*
|
|
|
|
**Svar**
|
|
```spoiler-block
|
|
|
|
A) Affinitetskromatografi är en kromatografimetod som bygger på att separera proteiner baserat på en viss egeskap. Exempelvis kan glykosylerade proteiner separeras ut genom att kulorna i kolonnen har molekyler som binder till sockerenheterna. Man kan även, som i detta fall, modifiera DNA-sekvensen för proteinet man är ute efter genom att lägga till en tag av histidin vilken binder väl till nickeljoner på kulorna.
|
|
|
|
B) För att få proteinet att lossna från kulorna krävs att man eluerar. Det kan ske med hjälp av en stark buffert eller saltlösning, ofta en kombination av båda.
|
|
|
|
C) Gelelektrofores, SDS-PAGE, kan användas för att analysera proteinets storlek samt hur väl proteinreningen lyckats.
|
|
```
|