vault backup: 2025-11-28 09:51:15

content/Biokemi/Gamla tentor/2022-12-19/5.md

@@ -0,0 +1,20 @@
+---
+tags:
+  - biokemi
+  - provfråga
+  - utforska-proteiner
+---
+Du jobbar på labb över sommaren och har fått i uppgift att köra affinitetskromatografi med en 6xHis-tag.  
+
+A) Beskriv kortfattat principen för affinitetskromatografi.  
+B) Hur kan man eluera proteinet?  
+C) Ange en metod som kan användas för analys av det eluerade proteinet.  
+*Max 200 ord.*
+
+**Svar**
+
+A) Affinitetskromatografi är en kromatografimetod som bygger på att separera proteiner baserat på en viss egeskap. Exempelvis kan glykosylerade proteiner separeras ut genom att kulorna i kolonnen har molekyler som binder till sockerenheterna. Man kan även, som i detta fall, modifiera DNA-sekvensen för proteinet man är ute efter genom att lägga till en tag av histidin vilken binder väl till nickeljoner på kulorna.  
+
+B) För att få proteinet att lossna från kulorna krävs att man eluerar. Det kan ske med hjälp av en stark buffert eller saltlösning, ofta en kombination av båda.  
+
+C) Gelelektrofores, SDS-PAGE, kan användas för att analysera proteinets storlek samt hur väl proteinreningen lyckats.