--- tags: - biokemi - utforska-proteiner - instuderingsuppgifter föreläsare: Ingela Parmryd --- ### Vad är definitionen av ”genom”? ```spoiler-block: Allt genetiskt material (DNA) i en organism eller cell. ``` ### 1. Vad menas med ”proteom”? ```spoiler-block: Samtliga proteiner som uttrycks i en cell, vävnad eller organism vid ett givet tillfälle. ``` ### 2. Vad menas med ett homogenisat? ```spoiler-block: En cell- eller vävnadssuspension där celler har brutits sönder. ``` ### 3. Egenskaper hos proteiner som kan användas för rening ```spoiler-block: Storlek, laddning, hydrofobicitet och specifik bindningsförmåga. ``` ### 4. I vilken ordning elueras proteiner vid gelfiltrering? ```spoiler-block: Stora proteiner först, små sist. ``` ### 5. Vilken laddning har proteiner som binder en katjonbytare? ```spoiler-block: Positiv laddning. ``` ### 6. Vilken laddning har proteiner som inte binder till katjonbytare? ```spoiler-block: Negativ eller neutral laddning. ``` ### 7. Vilken laddning har proteiner som binder en anjonbytare? ```spoiler-block: Negativ laddning. ``` ### 8. Vilken laddning har proteiner som inte binder till anjonbytare? ```spoiler-block: Positiv eller neutral laddning. ``` ### 9. Hur eluerar man protein från en katjonbytare? ```spoiler-block: Genom ökad salthalt eller ändrat pH. ``` ### 10. Vad menas med affinitetskromatografi? ```spoiler-block: Rening baserad på specifik bindning mellan protein och ligand. ``` ### 11. Hur elueras 6xHis-protein från Ni²⁺-kolonn? ```spoiler-block: Med imidazol. ``` ### 12. Vad kallas det automatiserade systemet för proteinrening? ```spoiler-block: ÄKTA-system. ``` ### 13. Vilken parameter följs oftast? ```spoiler-block: Absorbans vid 280 nm. ``` ### 14. Vilken gel används i SDS-PAGE? ```spoiler-block: Polyakrylamidgel. ``` ### 15. Vad är SDS? ```spoiler-block: Ett anjoniskt detergent (natriumdodecylsulfat). ``` ### 16. Vilken laddning har SDS? ```spoiler-block: Negativ. ``` ### 17. Vad hamnar högst upp respektive längst ner i SDS-PAGE? ```spoiler-block: Stora proteiner överst, små längst ner. ``` ### 18. Hur visualiseras SDS-PAGE? ```spoiler-block: Coomassie-färgning eller silverfärgning. ``` ### 19. Vad menas med proteinreferens? ```spoiler-block: Molekylviktsmarkör (protein ladder). ``` ### 20. Vad är isoelektrisk fokusering? ```spoiler-block: Separation av proteiner efter deras isoelektriska punkt (pI). ``` ### 21. Vad är tvådimensionell gelelektrofores? ```spoiler-block: Kombination av isoelektrisk fokusering och SDS-PAGE. ``` ### 22. Hur används SDS-PAGE för att följa proteinrening? ```spoiler-block: Genom att analysera renhet och bandintensitet över reningssteg. ``` ### 23. Vad är en antikropp? ```spoiler-block: Ett protein som specifikt binder ett antigen. ``` ### 24. Vad är ett antigen? ```spoiler-block: En molekyl som känns igen av antikroppar. ``` ### 25. Vad är en epitop? ```spoiler-block: Den del av antigenet som antikroppen binder. ``` ### 26. Vad kännetecknar en monoklonal antikropp? ```spoiler-block: Binder en enda specifik epitop. ``` ### 27. Vad kännetecknar polyklonala antikroppar? ```spoiler-block: Binder flera epitoper på samma antigen. ``` ### 28. Hur tillverkas monoklonala antikroppar? ```spoiler-block: Via hybridomteknik (B-cell + myelomcell). ``` ### 29. Beskriv ELISA ```spoiler-block: En enzymbaserad metod för att detektera antigen eller antikroppar. ``` ### 30. Beskriv indirekt ELISA ```spoiler-block: Antigen på platta → primärantikropp → enzymkopplad sekundärantikropp. ``` ### 31. Beskriv Sandwich ELISA ```spoiler-block: Antigen fångas mellan två antikroppar. ``` ### 32. Vilken ELISA-metod är mest specifik? ```spoiler-block: Sandwich ELISA. ``` ### 33. Kliniska applikationer för ELISA ```spoiler-block: Indirekt: antikroppsdetektion (infektioner). Sandwich: antigen-/hormondetektion. ``` ### 34. Vad är Western blot? ```spoiler-block: Proteiner separeras med SDS-PAGE, överförs till membran och detekteras med antikroppar. ``` ### 35. Skillnad mellan SDS-PAGE och Western blot? ```spoiler-block: SDS-PAGE separerar proteiner; Western blot identifierar specifika proteiner. ``` ### 36. Vad kan masspektrometri detektera? ```spoiler-block: Proteiner, peptider, metaboliter och lipider. ``` ### 37. Användningsområden för masspektrometri ```spoiler-block: Proteomik, identifiering av proteiner, posttranslationella modifieringar. ``` ### 38. Varför behövs kristaller för röntgenkristallografi? ```spoiler-block: För att ge regelbundet diffraktionsmönster. ``` ### 39. Varför är hög upplösning viktig? ```spoiler-block: För att kunna se atomära detaljer i strukturen. ``` ### 40. Vanligaste atomen i NMR? ```spoiler-block: ¹H (väte). ``` ### 41. Fördel med kryo-EM jämfört med röntgenkristallografi? ```spoiler-block: Kräver inga kristaller och kan studera stora komplex i nära nativt tillstånd. ```