vault backup: 2025-12-09 21:46:11

content/Biokemi/Gamla tentor/2023-12-18/5.md

@@ -13,15 +13,5 @@ B) Ange en metod för att analysera storleken på ditt framrenade protein och ge
 **Svar**
 ```spoiler-block
 
-A) Jonbyteskromatografi kan användas. Det är en metod där man kan rena ett protein baserat på dess laddning.  
-I denna metod finns det två olika typer av kolonner som kan användas: katjonbytare och anjonbytare.  
-Katjonbytare binder till katjoner (positivt laddade) och låter negativt laddade proteiner passera.  
-Anjonbytare binder till anjoner (negativt laddade) och tillåter passering av positivt laddade proteiner.  
-Sedan kan proteinet elueras med pH och/eller salt.  
-
-B) Storleken kan analyseras med metoden gelelektrofores.  
-Gelelektrofores går ut på att protein får migrera i en gel som befinner sig i ett elektriskt fält, där proteiner får gå från en negativ elektrod till en positiv.  
-De minsta proteinerna kommer att vandra snabbast och längst i gelen för att de har minst volym.  
-Man kan använda t.ex. ett fluorescerande ämne som gör att banden som bildas kan visualiseras under UV-strålning.  
-Sedan kan en storleksmarkör användas för att bestämma vilken storlek som de protein som man har undersökt har.  
+a) Jonbyteskromotografi. Efter att ha lösgjört proteinerna i homogenisat går reningsmetoden ut på att man för proteinlösningen genom en kolonn som innehåller kulor som antingen är positivt eller negativt laddade beroende på proteinets laddning som man vill ha ut. En katjonsbytare är negativt laddade kulor i kolonnen som kommer att attrahera positivt laddade proteiner från fasen man för igenom medan en anjonbytare däremot är positivt laddade kulor som kommer att attrahera negativt laddade proteiner. Det är proteinets totala laddning som selekteras. Sedan kan en buffert eller salt användas för att eluera proteinerna från de laddade kulorna i kolonnen för vidare analys. b) För att analysera storleken hade jag valt SDS page som är en elektrofores-metod där man först blandar i ämnet SDS (sodum dodecyl sulfate) som är negativt laddade molekyler som kommer att binda till aminosyrorna och slå ut proteinets tidigare laddning. Proteinetet kommer att binda SDS baserat på hur stort det är, ju större protein desto mer negativt laddat då fler aminosyror laddas av SDS och proteinerna får vandra i ett elektriskt fält där de minsta vandrar längst mot positiv pol då de hindras minst av de steriska hindrena i polyakrylamid-gelen. Separation map STORLEK
 ```